活检是诊断淋巴瘤的唯一可靠方法。活检是从患者的身体内获取细胞或组织，然后在显微镜下检查是否有癌细胞。病理学家使用显微镜检查组织的淋巴瘤细胞。
淋巴瘤被诊断后，可以进行免疫分型、流式细胞仪、荧光原位杂交（FISH）检测等进一步检查，来寻找不同类型淋巴瘤的特异性特征。
目前有以下几种类型的活检可以用于诊断淋巴瘤，医生根据每个人的情况选择相应类型进行活检。
●切除活检
如果怀疑淋巴瘤，这是最常见的活检类型。在这一过程中，外科医生通过切开皮肤切除整个肿物（淋巴结）或仅部分淋巴结。切除活检可以提供足够的样本来诊断淋巴瘤的确切类型，这是活检的首选类型。
●细针穿刺或针芯（穿刺枪）活检
在细针穿刺活检时，医生用一个非常薄的空心针连接到一个注射器，从一个淋巴结或器官中取（吸）少量的液体和小块人体组织。对于穿刺枪活检，医生使用更大的针获取一个稍大的组织。
针吸活检不需要手术，但在某些情况下，它不能获得足够的样本，以作出明确的诊断，仅适用于无法有效、安全地获得切除或切取部分病变组织的患者初次诊断时，最好是切除或切取部分病变组织。
对于复发的患者，可以通过穿刺获取的病变组织来诊断。大多数医生不使用穿刺活检来诊断淋巴瘤。
●其他类型的活组织检查
这些检查通常不做淋巴瘤诊断，但它们可用来帮助确定淋巴瘤的分期。
骨髓穿刺和活检：
通常在淋巴瘤被诊断后帮助确定是否已经到达骨髓。这两个检查经常在同一时间进行。常见的骨穿部位是骨盆后面的骨，在某些情况下可以是胸骨或其他的病变部位。
腰椎穿刺：
这个检查是在脑脊液中检测淋巴瘤细胞。患者侧卧，医生先麻醉脊柱下部区域，然后将一根空心的小针放在脊柱的骨头之间以取出一些液体。大多数淋巴瘤患者不需要这个检查。但某些伴中枢侵犯高危因素的淋巴瘤或如果有症状表明淋巴瘤已经侵犯到大脑、脊髓的患者需要做腰椎穿刺。
胸腔或腹腔液体活检：
当淋巴瘤扩散至胸腔或腹腔，可引起积液。可以将空心针穿过皮肤进入胸腔或腹部获取胸腔内的液体或腹腔内的液体。通常情况下，超声波是用来引导针吸。
医生在穿刺前先局部麻醉皮肤及皮下组织，然后用穿刺针将液体取出并在显微镜下观察淋巴瘤细胞。这个操作是从肺部周围的区域抽取液体，称为胸腔穿刺术。当它用于腹腔内收集液体，则被称为腹腔穿刺术。